产品目录

本系列产品是以尿素为原料的2D电泳样品提取液，是以干性尿素与其它非离子型，两性去污试剂为基础，外加一定体积的水化液构成，含有尿素的溶液在温度高于37℃或高pH值的情况下会造成分解，而温度过低可能造成析出，同时尿素就会在溶液体系中逐步和氰酸铵达成一定的平衡，异氰酸会与蛋白质的N末端、赖氨酸、精氨酸的氨基以及半胱氨酸的巯基发生氨甲酰化反应。所以在进行2D电泳样品提取时，采用新鲜的以尿素为基础的2D电泳样品提取液，有很重要的意义，本系列产品通过水化后，可以产生50mL的提取试剂，本系列Extraction Buffer对疏水性蛋白质的溶解能力由弱到强，可以根据您样品的特性，选择合适的2D电泳样品提取缓冲液，同时本系列试剂也可以用于对IPG Strips的水化。

• 对于没有使用完的溶液可分装成小管，置于-20℃保存，建议在一个月内使用完毕。
  
• 根据实验及文献要求可以向步骤1中混合溶解后的Extraction Buffer中额外加入一定量的还原试剂，蛋白酶抑制试剂，载体两性电解质，溴酚蓝等。
  
• 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
  
• 使用后请旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
  
• 本试剂只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果概不承担责任。

• 根据实验的样本数，称量出一定克数的干粉，对于Extraction Buffer I，II和III，按照每克干粉加入1.15mL的稀释液；对于Extraction Buffer IV，V和VI，按照每克干粉加入1mL的稀释液。
  
• 在涡旋振荡器上充分振荡，直到形成均一、透明的溶液。对于Extraction Buffer V，需要在30℃水浴加热10min左右，以促进溶解。
  
• 取一支1.5mL的离心管，加入所需的细胞或组织：(如：100mg动物组织或10⁷个培养细胞；经过酶消化去除细胞壁的50mg湿重的酵母；50μL的昆虫细胞沉淀；50mg细菌)向其加入500μL的新鲜的Extraction Buffer，进行超声破碎，每次30sec，5～6次，每次间隔1min或100mg植物组织经过液氮研磨，加入500μL的新鲜的Extraction Buffer。
  
• 将经过以上步骤处理的在离心管中的细胞或组织振荡10min，转置离心机，室温12000rpm离心10min取上清。
  
• 将沉淀的细胞碎片或组织再加入50～100μL的新鲜的Extraction Buffer，振荡10min后，室温12000rpm离心10min后取上清。
  
• 合并操作步骤4~5中的上清，用于后续2D电泳。